產(chǎn)品簡(jiǎn)介
辛基-瓊脂糖凝膠4FF是將辛基鍵合在瓊脂糖凝膠上形成的一種可利用疏水作用來實(shí)現(xiàn)目標(biāo)產(chǎn)品純化分離的中等疏水類介質(zhì)。適合各種蛋白的分離和純化。具有流速快，使用方便，應(yīng)用廣泛的特點(diǎn)。
產(chǎn)品參數(shù)
基質(zhì)：6% 交聯(lián)瓊脂糖凝膠
配基：正丁烷基n-Octyl
配基密度： 5μmol/mL
顆粒大?。?5-165μm
最大流速：600cm/h
工作pH：3-13
操作溫度：室溫
使用說明：辛基-瓊脂糖凝膠 4FF是一種中等疏水層析介質(zhì)，適合各種蛋白的分離和純化。
使用方法
1. 裝柱
（1） 將所有的試劑和填料達(dá)到室溫.配制初始緩沖液(平衡液)和緩沖液。
（2） 根據(jù)柱子大小取所需凝膠的量，清洗掉20%乙醇，抽干，用初始緩沖液（按凝膠：緩沖液=3:1比例）配成勻漿。
（3） 將柱內(nèi)及柱子底端用水或緩沖液潤(rùn)濕并保持一小段液體（液面略高于濾膜），務(wù)必使底端無氣泡。
（4） 用玻璃棒引導(dǎo)勻漿沿著柱內(nèi)壁一次性倒入柱內(nèi)，注意不要使用氣泡。打開柱子出液口，使凝膠在柱內(nèi)自由沉降，連結(jié)好柱子頂端柱頭。
（5） 打開蠕動(dòng)泵，讓緩沖液用使用時(shí)流速的1.33倍的流速流過，使柱床穩(wěn)定。用2-3倍柱體積的緩沖液平衡柱子。
2. 平衡
讓平衡緩沖液以一定流速流過柱子，到流出液電導(dǎo)和pH不變。平衡緩沖液一般是高鹽濃度的緩沖液，如：0.02-0.05mol/L的PBS加1-2.5mol/L(NH4)2SO4等。
3. 上樣
（6） 樣品用平衡液配制，渾濁的樣品要離心、過濾后上柱；
（7） 一般情況是讓目標(biāo)產(chǎn)品結(jié)合在柱子上，用平衡洗液洗去雜質(zhì)，再選擇一種洗脫液洗下目標(biāo)產(chǎn)品。
（8） 介質(zhì)對(duì)樣品組分吸附的程度取決于樣品的疏水性質(zhì)、流動(dòng)相的離子強(qiáng)度和溫度。溫度越大、鹽濃度越高或樣品組分疏水性越強(qiáng)，介質(zhì)對(duì)組分吸附越牢。
4. 洗脫
疏水介質(zhì)可用減小鹽濃度進(jìn)行洗脫。加表面活性劑或者有機(jī)溶劑可加強(qiáng)洗脫。最常用的洗脫液是低鹽濃度緩沖液，如：0.02-0.05mol/L的PBS。
5. 再生
一般用低鹽濃度的緩沖液洗，洗10倍以上柱體積，接著用結(jié)合蛋白的平衡液洗到平衡，可再次使用。若有失活的蛋白或者脂類物質(zhì)在再生時(shí)洗不掉，可用在位清洗（CIP）除去。
6. 在位清洗
（1） 對(duì)于以離子鍵結(jié)合上去的蛋白，可以用2M  NaCl去除。
（2） 對(duì)沉淀蛋白、以疏水作用結(jié)合的蛋白或者脂類物質(zhì)，可用1M  NaOH去除。
（3） 對(duì)強(qiáng)疏水性結(jié)合的蛋白、脂類等，可用4-10倍柱體積的70%乙醇或30%異丙醇清洗，但要注意有機(jī)溶劑的濃度以梯度的方式逐漸增加，否則容易產(chǎn)生氣泡。
清洗完畢后，用至少3倍柱體積緩沖液平衡柱子。
7. 去熱源
用0.5M的氫氧化鈉清洗柱子5-6小時(shí)或者用0.1M的氫氧化鈉24小時(shí)?；蛴靡韵虏襟E去除：
（1）2倍柱體積的70%的乙醇；
（2） 2倍柱體積50Mm Tris-HcL Ph7.5
（3）1倍柱體積4M尿素
（4）3倍柱體積的Tris緩沖液+0.1M  NaCl;
以上緩沖液都在無熱源的雙蒸水中配制。
8. 消毒
用0.5-1.0 M NaOH 室溫下洗8-10倍柱體積，初始緩沖液平衡柱子。
注意事項(xiàng)
（1）密封貯存于4°C-28°C（保存溶液為20%乙醇+0.1 M醋酸鈉），通風(fēng)、干燥的地方，不能冷凍。用過的柱子貯存于4°C（20%乙醇）。
（2）在裝柱、使用和保存柱子的時(shí)候，要避免柱子流干，氣泡進(jìn)入。

  備注：產(chǎn)品信息可能會(huì)有優(yōu)化升級(jí)。請(qǐng)以實(shí)際標(biāo)簽信息為準(zhǔn)。

辛基-瓊脂糖凝膠4FF

辛基-瓊脂糖凝膠4FF