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產(chǎn)品名稱:檸檬酸(CA)含量測(cè)定試劑盒 微量法

產(chǎn)品型號(hào):BC2155

產(chǎn)品報(bào)價(jià):

產(chǎn)品特點(diǎn):檸檬酸(CA)含量測(cè)定試劑盒 微量法
品牌:Solarbio | 貨號(hào):BC2155
檢測(cè)方法 : 微量法
規(guī)格: 100管/96樣

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BC2155檸檬酸(CA)含量測(cè)定試劑盒 微量法的詳細(xì)資料:

檸檬酸(CA)含量測(cè)定試劑盒 微量法

測(cè)定意義:CA是生物體內(nèi)常見(jiàn)的有機(jī)酸,是重要的食品風(fēng)味物質(zhì)。此外,CA是三羧酸循環(huán)*步反應(yīng)的產(chǎn)物。

測(cè)定原理:酸性條件下,檸檬酸還原Cr6+生成Cr3+,在545nm處有特征吸收峰;通過(guò)測(cè)定545nm吸光值的增加,即可計(jì)算出樣品中檸檬酸含量。

需要的儀器,耗材:低溫離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液槍、可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板和蒸餾水。

 檸檬酸(CA)含量測(cè)定試劑盒 微量法

操作步驟:一、樣品中檸檬酸提取: 1. 液體樣品中檸檬酸提?。喝?0.1mL 液體加試劑一 0.9mL,充分混勻,11000g, 4℃離心 10min,取上清液,待測(cè)。 2. 組織中檸檬酸提?。喊凑战M織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,加入 1mL 試劑一)進(jìn)行冰浴勻漿。11000g,4℃離心 10min,取上清置冰上待測(cè)。 3. 線粒體中檸檬酸提?。喊凑战M織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,加入 1mL 試劑一)進(jìn)行冰浴勻漿,600g/min,4℃離心 5min;取上清另一 EP 管中,11000g, 4℃離心 10min,棄上清(此上清液可用于細(xì)胞質(zhì) CA 含量測(cè)定);向沉淀中加試劑二 200μl,以及試劑三 2μl,充分懸浮溶解,11000g,4℃離心 10min,取上清液,待測(cè)。 4. 細(xì)菌、真菌中:按照細(xì)胞數(shù)量(10 4個(gè)):試劑一體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬(wàn)細(xì)胞加入 1mL 試劑一),冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率 300w,超聲 3 秒,間隔 7 秒,總時(shí)間 3min); 11000g,4℃離心 10min,取上清置冰上待測(cè)。二、測(cè)定操作: 1. 分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱 30 min,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到 545 nm,蒸餾水調(diào)零。 2. 試劑一置于 30℃水浴中預(yù)熱 30min。 3. 空白管:取 0.5 mL EP 管,依次加入 20μL 蒸餾水,140μL 試劑一,20μL 試劑四,20μL 試劑五,混勻后室溫靜置 30min,于 545nm 測(cè)定吸光度,記為 A 空白管。 4. 標(biāo)準(zhǔn)管:取 0.5 mL EP 管,依次加入 20μL 標(biāo)準(zhǔn)液,140μL 試劑一,20μL 試劑四,20μL 試劑五,混勻后室溫靜置 30min,于 545nm 測(cè)定吸光度,記為 A 標(biāo)準(zhǔn)管。 5. 測(cè)定管:取 0.5 mL EP 管,依次加入 20μL 上清液,140μL 試劑一,20μL 試劑四,20μL 試劑五,充分混勻后室溫靜置 30min,于 545nm 測(cè)定吸光度,記為 A 測(cè)定管。

 相關(guān)文獻(xiàn):

《Intracellular citrate accumulation by oxidized ATM-mediated metabolism reprogramming via PFKP and CS enhances hypoxic breast cancer cell invasion and metastasis》 作者:Meixi Peng, Dan Yang, Yixuan Hou, Shuiqing Liu, Maojia Zhao, Yilu Qin, Rui Chen, Yong Teng & Manran Liu 期刊:Cell Death and Disease 影響因子:5.959 PMID:30850587
《Cancer-Associated Fibroblasts Accelerate Malignant Progression of Non-Small Cell Lung Cancer via Connexin 43-Formed Unidirectional Gap Junctional Intercellular Communication》 作者:Luo M,Luo Y, Mao N, Huang G, Teng C,Wang H, Wu J, Liao X, Yang J 期刊:Cellular Physiology and Biochemistry 影響因子: PMID:30453281
 

 

 

 

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