產(chǎn)品名稱:：胰蛋白酶活性檢測試劑盒

產(chǎn)品英文名: Trypsase Assay Kit

產(chǎn)品貨號：BC2310            產(chǎn)地：北京市通州區(qū)馬駒橋聯(lián)東U谷8三樓

產(chǎn)品規(guī)格：50管/48樣         產(chǎn)品商標：solarbio
保存與運輸：4℃保存或-20℃保存；            參考價格：620
庫存狀態(tài)：現(xiàn)貨                          
關鍵字: 胰蛋白酶檢測試劑盒|胰蛋白酶檢測|胰蛋白酶|試劑盒

簡要介紹：
胰蛋白酶選擇性水解變性蛋白質中由賴氨酸或精氨酸的羧基所構成的肽鏈，是一種重要的消化酶。此外，胰蛋白酶還廣泛應用于膿胸、血胸、外科炎癥、潰瘍、創(chuàng)傷性損傷等所產(chǎn)生的局部水腫、血腫及膿腫等的輔助治療。 
    胰蛋白酶催化水解BAEE的酯鍵，生成BA，BA在253nm處有吸收峰，通過測定253nm 吸光度增加速率，即可計算出胰蛋白酶的活性。 

產(chǎn)品詳細描述
產(chǎn)品內容：
提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存。
試劑一：粉劑×1支，4℃避光保存。臨用前加1mL蒸餾水充分溶解。
試劑二：液體50mL×1瓶，4℃保存。

產(chǎn)品說明：
胰蛋白酶選擇性水解變性蛋白質中由賴氨酸或精氨酸的羧基所構成的肽鏈，是一種重要的消化酶。此外，胰蛋白酶還廣泛應用于膿胸、血胸、外科炎癥、潰瘍、創(chuàng)傷性損傷等所產(chǎn)生的局部水腫、血腫及膿腫等的輔助治療。
胰蛋白酶催化水解BAEE的酯鍵，生成BA，BA在253nm處有吸收峰，通過測定253nm 吸光度增加速率，即可計算出胰蛋白酶的活性。
試驗所需自備儀器和樣品：
紫外分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、1mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
操作步驟：
一、粗酶液提?。?/span>
稱約0.1g組織，加入1mL提取液，冰上充分研磨，10000rpm 4℃離心10min，取上清，即粗酶液，置冰上待測。或直接稱取0.1g酶制品，加入1mL提取液，置冰上待測。
二、測定：
1. 分光光度計預熱30 min以上，調節(jié)波長到253 nm，蒸餾水調零。
2. 工作液的配制：將試劑一與試劑二按 2:97配置工作液，按需配制，并置于37℃水浴預熱30min以上。
3. 空白管：取1mL石英比色皿，加入990µL工作液，再加入10μL蒸餾水，混勻，迅速于253nm測定0s和60s的吸光度，記為△A空白。
4. 測定管：取1mL石英比色皿，加入990µL工作液，再加入10μL粗酶液，混勻，迅速于253nm測定0s和60s的吸光度，記為△A測定。
三、胰蛋白酶活性計算：
1.按蛋白濃度計算：
活性單位（U）定義：在1mL體系下，37℃每毫克蛋白質每分鐘催化253nm處吸光值增加0.001為一個單位。
胰蛋白酶（U/mg prot）= (△A測定-△A空白) ÷0.001÷（Cpr×V1）÷T
=100000×(△A測定-△A空白) ÷Cpr
2.按樣本鮮重計算：
活性單位（U）定義：在1mL體系下，37℃每克組織每分鐘催化253nm處吸光值增加0.001為一個單位。
胰蛋白酶（U/mg prot）= (△A測定-△A空白) ÷0.001÷（W×V1÷V2）÷T
=100000×(△A測定-△A空白) ÷W
Cpr：粗酶液蛋白質濃度（mg/mL），需要另外測定；W：組織質量（g）；V1：加入反應體系中粗酶液體積（mL），10μL=0.01 mL；V2：粗酶液總體積（mL），1 mL；T：反應時間（min），1min。
注意事項：
實驗前用1～2個樣做預實驗，保證吸光值變化在0.01～0. 15之間。


相關文獻：
《Long noncoding RNA ENST00000413528 sponges microRNA‐593‐5p to modulate human glioma growth via polo‐like kinase 1》 作者:Ren Zhang，Ruo‐Lun Wei，Wei Du，Li‐Wei Zhang，Tao Du，Ya‐Dong Geng，Xin‐ting Wei 期刊:CNS Neuroscience & Therapeutics 影響因子:4.458 PMID:30924320




 

胰蛋白酶活性檢測試劑盒