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土壤脫氫酶(S-DHA)活性檢測試劑盒

可見分光光度法

產(chǎn)地：北京市通州區(qū)馬駒橋聯(lián)東U谷8三樓
產(chǎn)品商標(biāo)：solarbio
注意：正式測定前務(wù)必取2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定
貨號(hào)：BC0390
規(guī)格：50T/24S
保存與運(yùn)輸：4℃保存或-20℃保存；            
參考價(jià)格：750
庫存狀態(tài)：現(xiàn)貨


產(chǎn)品簡介：
土壤脫氫酶(Soil dehydrogenase, sDHA)的活性可以反映土壤體系內(nèi)活性微生物量以及其對有機(jī)物的降解活性，可以作為土壤微生物的降解性能指標(biāo)。
氫受體2, 3, 5 - 氯化三苯基四氮唑（2,3,5-Triphenyl Tetrazolium Chloride, TTC）在細(xì)胞呼吸過程中接受氫以后，被還原為三苯基甲臜（Triphenyl Formazone, TF），TF 呈現(xiàn)紅色，在波長485nm 處有大吸收峰，采用分光光度法于485nm 測定其吸光值，即得土壤脫氫酶活性。

試驗(yàn)中所需的儀器和試劑：
篩子、天平、恒溫培養(yǎng)箱或水浴鍋、低溫離心機(jī)、可見分光光度計(jì)、玻璃比色皿，冰、蒸餾水、丙tong（不允許快遞，請用戶自備）。

產(chǎn)品內(nèi)容：
試劑一：粉劑×1 瓶，使用前加30ml 水溶解，4℃避光保存（盡量現(xiàn)配現(xiàn)用）。
試劑二：液體50ml×1 瓶，4℃保存。
試劑三：丙tong，自備。

操作步驟：
一、樣本前處理：
1. 土壤樣品： 準(zhǔn)確稱取過40 目篩的新鮮土壤樣品約0.1g（以保證TTC 與土壤顆粒充分接觸）。
2. 污泥樣品：污泥用蒸餾水洗滌，12000rpm，25℃，離心10 min，棄上清，反復(fù)3- 4 次。
二、測定操作：
                    對照管       測定管
樣品（g）        0.1            0.1
試劑一（ml） 0.5
試劑二（ml） 1 0.5
充分混勻，37℃，暗培養(yǎng)6h，取出后立即冰浴5min
試劑三（ml） 0.5 0.5
反復(fù)震蕩數(shù)次，37℃保溫10min，12000rpm，4℃，離心5min，取上清1ml 于1ml 玻璃比色皿，分光光度計(jì)提前30 分鐘預(yù)熱，蒸餾水調(diào)零，測定對照管和測定管，計(jì)算△A。

脫氫酶活力的計(jì)算：
酶活單位定義：在37℃時(shí)，每克樣品每小時(shí)使每ml 反應(yīng)體系OD 值每增加0.01 為一個(gè)酶活單位。
計(jì)算公式：sDHA 活性（U/g）=0.01△ A÷培養(yǎng)時(shí)間（6h）÷樣品質(zhì)量（0.1g）×V 反總（1.5ml）= 250×A485

注意事項(xiàng)：
1. 配制好的試劑一避光保存于4℃，在一周內(nèi)使用，若出現(xiàn)紅色，則不能使用。
2. 試劑三易揮發(fā)，有毒，為了您的健康，請穿實(shí)驗(yàn)服，戴口罩，戴乳膠手套操作。
3. 反應(yīng)完成后立即冰浴以終止反應(yīng)。
4. 如果測定出來的吸光值較大，減少樣品用量再進(jìn)行測定，若吸光值過小則延長培養(yǎng)時(shí)間。
5. 試劑盒2-8℃保存。

相關(guān)文獻(xiàn)：
《SIRT5-mediated SDHA desuccinylation promotes clear cell renal cell carcinoma tumorigenesis》 作者:Yuanzhen Ma,Yijun Qi,Lei Wang,Zhaoxu Zheng,Yue 期刊:Free Radic. Biol. Med. 影響因子:5.657 PMID:30703481
 

土壤脫氫酶(S-DHA)活性檢測試劑盒