缺點(diǎn)：①易與常見(jiàn)的鈣、鎂、重金屬離子形成沉淀；②抑制某些生化過(guò)程；

 

　　2. Tris緩沖液

 

　　Tris緩沖液在生物化學(xué)研究中有著廣泛的應(yīng)用。它是弱堿，通常在“中性”范圍內(nèi)使用。Tris-HCl緩沖:pH = 7.5 ~ 8.5;三磷酸緩沖液:pH = 5.0 ~ 9.0。

 

　　除TRIS - hcl外，TRIS還有多種衍生化緩沖:

 

　　TBS=Tris-HCl+ NaCl+KCl，常用來(lái)清洗免疫染色組織或Western blotting中的Western blotting膜;

 

　　TBST=Tris-HCl+NaCl+tween20，一種常用于Western Blotting的膜緩沖液;

 

　　TE=Tris-HCl+EDTA，對(duì)DNA堿基具有保護(hù)作用，常用于DNA的穩(wěn)定和儲(chǔ)存;

 

　　TAE=Tris堿+乙酸+EDTA，是一種廣泛應(yīng)用于短片段DNA電泳的緩沖體系;

 

　　TBE=三堿基+硼酸+EDTA，適用于長(zhǎng)期DNA電泳，對(duì)小片段有較好的分離效果。

 

　　優(yōu)點(diǎn)： ①因?yàn)門(mén)ris堿的堿性較強(qiáng)，所以可以只用這一種緩沖體系配制pH范圍由酸性到堿性的大范圍pH值的緩沖液；②對(duì)生物化學(xué)過(guò)程干擾很小，不與鈣、鎂離子及重金屬離子發(fā)生沉淀。

 

　　缺點(diǎn)：①緩沖液的pH值受溶液濃度影響較大，緩沖液稀釋十倍，pH值的變化大于0.1；②溫度效應(yīng)大，溫度變化對(duì)緩沖液pH值的影響很大，所以一定要在使用溫度下進(jìn)行配制，室溫下配制的Tris-HCl緩沖液不能用于0℃～4℃。 ③易吸收空氣中的CO2，所以配制的緩沖液要蓋嚴(yán)密封。④此緩沖液對(duì)某些pH電極發(fā)生一定的干擾作用，所以要使用與Tris溶液具有兼容性的電極。

 

　　3. Good’s緩沖液

 

　　在 1960 年代中期，N.E.Good鑒于一般的緩沖液系統(tǒng)并不適合生化實(shí)驗(yàn)所使用，必須用人為設(shè)計(jì)和人工合成的方法來(lái)找到專門(mén)用于生命科學(xué)研究的特定的緩沖體系，這些緩沖體系們都具有以下特質(zhì)：

 

　　1.pKa 在6~8 之間；2.在水溶液中有高溶解度；3.鹽效應(yīng)很??；4.不易被運(yùn)送通過(guò)細(xì)胞膜；5.不易受溫度、離子組成、濃度等因素影響解離度；6.不會(huì)與金屬離子形成錯(cuò)合物，或錯(cuò)合物不沉淀、不干擾生物活性；7.化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定。

 

　　Good’s緩沖液的主要優(yōu)點(diǎn)是不參加和不干擾生物化學(xué)反應(yīng)過(guò)程，對(duì)酶化學(xué)反應(yīng)等無(wú)抑制作用，所以它們專門(mén)用于細(xì)胞器和極易變性的、對(duì)pH敏感的蛋白質(zhì)和酶的研究工作。

 

　　其缺點(diǎn)是：①價(jià)格昂貴，②對(duì)測(cè)定蛋白質(zhì)含量的雙縮脲法和Lowry法不適用，因?yàn)樗鼈儠?huì)使空白管的顏色加深。

 

　　4.甘氨酸緩沖液

 

　　甘氨酸緩沖液pH值范圍廣，應(yīng)用范圍廣。pH值范圍為2.0~11.0。