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Western Blot膜再生液說明書

Western Blot膜再生液說明書
貨號:SW3020
規(guī)格:100 ml / 500 ml
保存:室溫保存,一年有效。
產(chǎn)品簡介:
使用膜再生液可以對同一張膜進行多次Western Blot檢測。在室溫條件下,將用過的膜浸泡在膜再生液10-60分鐘,可在不影響抗原蛋白的情況下清除膜上結(jié)合的抗體。隨后,可以使用不同的抗體進行下一輪Western Blot實驗。適宜從少量樣品多次檢測不同蛋白質(zhì)。即使樣品量并不匱乏,采用這一策略多次檢測同一張膜上的蛋白,能省去給藥處理、蛋白電泳和膜轉(zhuǎn)移等耗費性步驟。而且可以消除重新上樣而帶來的誤差,使可比性更強。 Western Blot膜再生液特點是:無毒無味無害,室溫下使用,室溫下保存;可對同一張膜進行5次以上的Western Blot檢測。適用:清除硝酸纖維素膜或PVDF膜上結(jié)合的抗體,不影響抗原蛋白。
使用方法: 1. 將膜充分浸泡于適當(dāng)體積的再生液中,室溫洗脫10-20分鐘,時間長短應(yīng)該參考注意事項進行優(yōu)化,洗脫某些抗體需較長時間,更有長達60分鐘之久。 2. 取出膜,用洗滌液(如TBST等)漂洗兩次。 3. 此時膜上抗體已除去,可再加入另一種抗體進行檢測。
注意事項: 1. 膜再生液實質(zhì)是在不影響膜上結(jié)合的抗原的條件下將抗體洗脫下來,實際操作中,膜類型、抗體類型、濃度及抗原特性都影響洗脫難易度。 2. 用ECL顯色后,再生液洗脫幾分鐘后,可再次加入ECL顯色液顯影,如膠片上顯示條帶,表明抗體未除凈,須進一步在再生液中浸泡,膠片上無顯色。 3. 使用脫脂奶粉封閉的膜要比使用BSA封閉的膜更容易再生。 4. 盡量避免讓膜干燥。

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