如何選擇合適的重組蛋白

選擇合適的重組蛋白產品，對你得到正確的實驗結果關重要，可從以下幾點進行選擇：

1、蛋白來源

對于一些蛋白，需要進行一系列的翻譯后修飾才能成為具有活性的成熟蛋白。細菌不能提供這樣的修飾，而哺乳動物細胞可以。因此，選購時應注意蛋白的來源。例如，novaprotein的人IL-4是在E. coli中制備的，金斯瑞的人IL-4是在哺乳動物CHO細胞中制備的。

當然除了上面提到的兩種表達系統(tǒng)外，還有酵母和昆蟲表達系統(tǒng)，四種系統(tǒng)各有優(yōu)劣，選重組蛋白是一定要注意。

2、種屬來源

蛋白的種屬來源常見的有人源、小鼠源和大鼠源等。一般來說，不同種屬之間的蛋白同源性在80%以上就可視為有交叉活性，可推薦使用。

3、生物活性和穩(wěn)定性

蛋白的純度、內毒素水平和批次間穩(wěn)定性等直接會影響實驗結果，因此，高品質的蛋白產品會嚴格監(jiān)控這一環(huán)節(jié)，并且提供詳細數(shù)據。同時，在選擇蛋白產品時還需考慮其生物活性。

一般記得以下五點就行：

· 大多數(shù)人類細胞因子對小鼠細胞都有活性。

· 許多小鼠細胞因子對人類細胞也有活性，但比相應人類細胞因子活性低。

· 一些人類的細胞因子（如IL-7）在小鼠細胞中表現(xiàn)出比小鼠細胞因子更高的活性。

· 干擾素、GM-CSF、IL-3 和IL-4 有物種特異性，對于非人類細胞幾乎沒有活性。

· 成纖維細胞生長因子和神經營養(yǎng)因子是高度保守的，在其它的動物細胞中也能表現(xiàn)很好的活性。

4、蛋白形式

通常有兩種形式：含牛血清白蛋白BSA或不含BSA，不含BSA一般用“CF"表示。加入BSA可以提高蛋白質的穩(wěn)定性，增加了貯存期限。含BSA的蛋白可以作為細胞組織培養(yǎng)物或者ELISA實驗中的理想標準品，而CF形式的蛋白尤其適用于活體實驗。以R&D systems的Human IL?4為例，就有兩種形式，買之前要先明確自己用來做什么實驗的。

5、查閱文獻

這個是快捷的方法，怎么去查文獻是我們必須要掌握的技能。

雖有萬般方法，但是只要你會查閱文獻，則萬事皆定。

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