1. Q：G8140 綠色熒光核酸染料(10000×) 染色，條帶不亮是為什么？
A：綠色熒光核酸染料特別適合于大片段 DNA 的檢測(大于 1kb 的片段,檢測靈敏度與 EB 相當);當 DNA 片段小于 1kb 時,檢測靈敏度低于 EB,特別是低于 500bp 的片段, 綠色熒光核酸染料可能亮度很弱或檢測不到.如果檢測小片段的 DNA,請選用G8142,該染色劑適合于檢測所有片段大小的 DNA 片段。
一般的，100mL膠加10微升染料，如果覺得熒光較弱，可適當增加染料用量。
2. Q：使用G8142 GoldView II 核酸染料 進行1%瓊脂糖凝膠電泳，膠回收PCR產物時，電泳結果顯示MARK和目的條帶均不清晰，呈彌散狀，后續(xù)實驗無法進行。
A：使用時，請將商品化的 Marker 用 1×DNA Loading Buffer 作 5-10 倍的稀釋，上樣 1-10µl, 以得到較好的結果(通常稀釋 10 倍后上樣 5ul)。對于待檢測樣品，通常僅需 1-2µl 即可。如果濃度較高，也須作一定倍數稀釋，否則會造成條帶不整，影響遷移速率。凝膠回收請選擇點染方法。
3. Q：提取量不夠？
A：一般的，增加樣本量是Z簡單的方法。此外，吸附膜的主要原理是低溫結合、高溫洗脫。因此，在吸附柱靜置時，放在4°結合3-5min，再重新吸附一次，通過增加結合次數達到提高提取量的目的。如果提取的質粒較小或拷貝數很低，可以在吸附那一步適當加入少量的1/5-1/3的異丙醇，提高回收率（一般不建議）
4. Q：D1140 提取量有多少？
A：因質粒拷貝數的差異性，不一定能夠上百。
5. Q：有專門用于提取質粒的柱子嗎？
A：N1010和N1011-A都可以
6. Q：N1011-B 可以用于提取質粒嗎？
A：不可以。只能用于提取基因組，提取質粒會造成質粒虛高。
7. Q：N1010 系列的柱子，可以容納多少體積溶液？
A：650-700微升左右
8. Q：提取出的質粒用于測序，可以用你們的洗脫緩沖液嗎？
A：可以的，一般情況下影響不大。如果不放心，可以換用無菌ddH2O洗脫。
9. Q：提取質粒后，做轉化，轉不出來？
A：一般優(yōu)先懷疑感受態(tài)，若確認感受態(tài)沒問題，再檢測是否用錯抗生素或是操作中有問題。如果確認是質粒的原因，可加大轉化質粒的用量（一般的，質粒轉化僅需1微升左右（質粒濃度在500ng/ul左右），若質粒濃度很低（小于100ng/ul），可以將質粒用量提高至10微升）
10. Q：提取出的質粒，PCR沒有條帶？
A：1.檢驗引物是否適用；2.檢驗程序是否合適；3.檢驗自己操作過程中是否有問題；4.質粒濃度不可太高（一般PCR的質粒濃度在50-100ng/ul之間）
11. Q：轉化質粒是，可以加抗生素嗎？
A：可以的，不會影響質粒轉化效率。
12. Q：沒有提出任何質粒？
A:1.菌體老化（重新轉化或活化菌株）？2.裂解不充分；3.菌體中真的無質粒；4.檢查試劑盒中的試劑有無出現沉淀；5.加洗脫液時，沒有加到吸附膜上或加的體積太少
13. Q：提出的質粒PCR、酶切鑒定中有一個有問題，能用嗎？
A：不能。
14. Q：P3110 pET-28a（+） 跑膠檢測 質粒大小和說明書上大小不一致。
A：如果想要跑膠檢測質粒大小，需要先將質粒進行單酶切，將質粒變?yōu)榫€性的再進行跑膠鑒定。超螺旋或是開環(huán)狀態(tài)的質粒都無法表示質粒的大小。如果客戶不認可單酶切結果，可以直接測序檢測。
15. Q：R1030 RNase A溶液(10mg/ml ) 使用RNase A從大腸桿菌中提質粒，質粒溶液中的 RNA沒有去掉。
A：RNase A溶液 工作濃度是200ug/ml ；而客戶這邊10ug/ml 建議增大用量。
16. Q：質粒全沒有被內切酶切割？
A：1.酶活低，可以延長時間或是用量；2.質粒和酶活不匹配，優(yōu)化酶切條件；3.質粒不純，含有SDS，酚，EDTA等內切酶抑制因子；4.質粒上的酶切位點突變了；5. DNA不存在該酶識別順序；6.buffer和酶不匹配
17. Q：16.質粒酶切不全？
A：1.酶活低，可以延長時間或是用量；2.質粒和酶活不匹配，優(yōu)化酶切條件；3.沒有混勻酶切體系；4.buffer和酶不匹配
18. Q：DNA片段數目多于理倫值?
A：1.內切酶星狀活性；2.其它內切酶污染：換一支新的酶或buffer；3；底物中含其它DNA雜質：重新提質粒
19. Q：跑膠檢驗時，條帶拖尾，模糊？
A：1.濃度過高；2.鹽離子高；3.有蛋白污染；4.降解了；5.換新的電泳液
20. Q：4.Q：那個柱子可以用于膠回收？（質粒提取、膠回收、基因組、PAGE凝膠回收的試劑盒中的柱子）
A: N1030 離心式過濾柱，主要用于過濾碎膠等較大的雜質
N1010/N1012/N1011-A 可用于膠回收（質粒、片段等）
N1011-B 主要用于提基因組，不用于提質粒（會虛高）
21. Q：質粒提取類試劑盒中，所有的酶都是單發(fā)的嗎？
A：是的。因為一般都要-20保存。所以不放在試劑盒里。以附件形式單發(fā)（冰盒/冰袋）
22. Q：SN0020 細胞核提取試劑盒 小鼠肝臟組織，勻漿后離不下去。
A：加熱一下，讓溶液不要那么粘稠。
