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如何選擇符合實驗要求的ELISA試劑盒?

更新時間:2021-08-09點擊次數(shù):1339
   ELISA的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性,酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。在測定時,受檢標本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與液體中的其他物質分開。再加入酶標記的抗原或抗體,也通過反應而結合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。加入酶反應的底物后,底物被酶催化成為有色產物,產物的量與標本中受檢物質的量直接相關,故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。ELISA試劑盒在選購時應注意以下幾個方面:

  1、明確研究種屬:一般來說,廠家都會在產品名稱上標明種屬,且為*個單詞,檢索種屬的常用語言為英文。

  2、明確樣本類型:不同廠家驗證樣本類型不同,即使同一廠家不同試劑盒,其驗證樣本類型也不盡相同。特別是復雜的血漿樣本,因此購買前需仔細核對。

  3、會預測自己的目標因子的濃度:一般來說,待測因子可以根據(jù)經驗或資料獲得參考的檢測范圍,且正常人與疾病狀態(tài)存在差異。因而,必要時進行樣本的稀釋及選擇合適檢測范圍的試劑盒極其重要。

  4、檢查試劑盒進行過哪些質控質控數(shù)據(jù)在說明書中即可找到,在購買前檢查試劑盒是否進行過嚴格的質控實驗,包括批次內(Intra-Assay)及批次間(Inter-Assay)、摻入回收實驗、線性稀釋實驗及交叉反應測試等,每個數(shù)據(jù)最好都看一下,確保*的結果重現(xiàn)性及準確性。

  5、需檢測的因子數(shù)量如果待測因子超過 5 個,且樣本量較小時,單因子 ELISA 檢測方法并不是好的選擇。建議考慮多因子檢測方法,可節(jié)約樣本及時間成本,也可保證檢測結果準確。

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