胰蛋白酶消化液使用說明

更新時(shí)間：2017-12-01

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胰蛋白酶消化液使用說明

　　使用說明：

　　1.貼壁細(xì)胞的消化：

　　a)吸去培養(yǎng)液，用無菌的PBS、Hanks液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次，以去除殘余的血清。

　　b)加入少量胰蛋白酶-EDTA消化液，蓋過細(xì)胞即可，室溫放置1-2分鐘。不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同，對于貼壁牢固的細(xì)胞可適當(dāng)延長消化時(shí)間。

　　c)顯微鏡下觀察，細(xì)胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變化；或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來。此時(shí)吸除消化液。加入含血清的細(xì)胞培養(yǎng)液，吹打下細(xì)胞，即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

　　d)如果發(fā)現(xiàn)消化不足，可加入胰蛋白酶-EDTA消化液重新消化。

　　e)如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過長，未及吹打細(xì)胞，細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落，直接用胰酶細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000-2000g離心1分鐘，沉淀細(xì)胞，盡量去除胰酶細(xì)胞消化液后，加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞，即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

　　2.組織的消化：

　　不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。

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