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細(xì)胞凍存與復(fù)蘇操作步驟與注意事項(xiàng)文檔
2025-08-28 細(xì)胞凍存是細(xì)胞保存的主要方法之一。利用凍存技術(shù)將細(xì)胞置于-196℃液氮中低溫保存，可以使細(xì)胞暫時(shí)脫離生長狀態(tài)而將其細(xì)胞特性保存起來，這樣在需要的時(shí)候再復(fù)蘇細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)。而且適度地保存一定量的細(xì)胞，可以防止因正在培養(yǎng)的細(xì)胞被污染或其他意外事件而使細(xì)胞丟種，起到了細(xì)胞保種的作用。一、原理在不加任何條件下直接凍存細(xì)胞時(shí)，細(xì)胞內(nèi)和外環(huán)境中的水都會(huì)形成冰晶，能導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)發(fā)生機(jī)械損傷、電解質(zhì)升高、滲透壓改變、脫水、PH改變、蛋白變性等，能引起細(xì)胞死亡。如向培養(yǎng)液加入保護(hù)劑，可使冰點(diǎn)降低。...
關(guān)于CCK8實(shí)驗(yàn)步驟的敘述
2025-08-28 CCK-8為細(xì)胞增殖檢測試劑盒，細(xì)胞增殖是生物體的重要生命特征，細(xì)胞以分裂的方式進(jìn)行增殖。必須強(qiáng)調(diào)指出，通過細(xì)胞分裂，可以將復(fù)制的遺傳物質(zhì)，平均地分配到兩個(gè)子細(xì)胞中去?？梢?，細(xì)胞增殖是生物體生長、發(fā)育、繁殖和遺傳的基礎(chǔ)。CCK8實(shí)驗(yàn)步驟如下。CCK-8實(shí)驗(yàn)步驟1、在96孔板中配置100μl的細(xì)胞懸液。將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱預(yù)培養(yǎng)24小時(shí)（37℃，5%CO2）。2、向培養(yǎng)板加入10μl不同濃度的待測物質(zhì)。3、將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱孵育一段適當(dāng)?shù)臅r(shí)間（例如：6、12、24或48小時(shí)）。4、向...
MTT法檢測細(xì)胞活性步驟及原理
2025-08-26 要知道MTT法檢測細(xì)胞活性步驟首先要知道MTT是什么？MTTMTT是一種粉末狀化學(xué)試劑，全稱為3-(4,5)-dimethylthiahiazo(-z-y1)-3,5-di-phenytetrazoliumromide，漢語化學(xué)名為3-(4，5-二甲基噻唑-2)-2，5-二苯基四氮唑溴鹽，商品名：噻唑藍(lán)。是一種黃顏色的染料。MTT法檢測細(xì)胞活性原理檢測原理為活細(xì)胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍(lán)紫色結(jié)晶甲瓚（Formazan）并沉積在細(xì)胞中，而死細(xì)胞無...
MTT實(shí)驗(yàn)步驟有哪些，有什么注意事項(xiàng)
2025-08-26 MTT通常用于藥物(也包括其他處理方式如放射線照射)對(duì)體外培養(yǎng)的細(xì)胞毒性的測定以及.細(xì)胞增殖及細(xì)胞活性測定。該方法已廣泛用于一些生物活性因子的活性檢測、大規(guī)模的抗腫瘤藥物篩選、細(xì)胞毒性試驗(yàn)以及腫瘤放射敏感性測定等。它的特點(diǎn)是靈敏度高、經(jīng)濟(jì)。但是由于MTT經(jīng)還原所產(chǎn)生的甲瓚產(chǎn)物不溶于水，需被溶解后才能檢測。這不僅使工作量增加，也會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性產(chǎn)生影響，而且溶解甲瓚的有機(jī)溶劑對(duì)實(shí)驗(yàn)者也有損害。在MTT實(shí)驗(yàn)步驟中要注意的是MTT有致癌性，用的時(shí)候小心,有條件最好帶那種透明的薄...
簡述細(xì)胞培養(yǎng)的步驟
2025-08-26 細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)也叫細(xì)胞克隆技術(shù)，在生物學(xué)中的正規(guī)名詞為細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。現(xiàn)代生物技術(shù)一般認(rèn)為包括基因工程技術(shù)、細(xì)胞工程技術(shù)、酶工程技術(shù)和發(fā)酵工程技術(shù)，而這些技術(shù)的發(fā)展幾乎都與細(xì)胞培養(yǎng)有密切關(guān)系，特別是在醫(yī)藥領(lǐng)域的發(fā)展，細(xì)胞培養(yǎng)更具有特殊的作用和價(jià)值。以下來具體講一下細(xì)胞培養(yǎng)的步驟。細(xì)胞培養(yǎng)的步驟一、細(xì)胞復(fù)蘇：1.將新鮮培養(yǎng)基置于37℃水浴鍋中回溫，回溫后噴以75%酒精并擦拭之，移入無菌操作臺(tái)內(nèi)。如配置：50mL完-全培養(yǎng)基(含10%FBS，1%青鏈霉素雙抗)44.5mL基礎(chǔ)培養(yǎng)基+...
動(dòng)物外周血淋巴細(xì)胞分離液的注意事項(xiàng)
2025-08-26 使用的注意事項(xiàng)：1.開封前顛倒混勻，本分離液為無菌產(chǎn)品，為延長分離液保存時(shí)間，請(qǐng)?jiān)跓o菌條件下啟封，避免微生物污染。。2.分離液使用時(shí)應(yīng)始終保持室溫（18℃~25℃），如室內(nèi)溫度較低，可將分離液預(yù)熱。4℃或者是溫度較低的條件下離心，可能會(huì)導(dǎo)致白膜層中紅細(xì)胞污染加重。3.血液樣本最好為新鮮抗凝血（采血2h以內(nèi)），為保持淋巴細(xì)胞的活性，應(yīng)避免冷凍和冷藏。4.稀釋血液或洗滌細(xì)胞，不可使用含Ca、Mg離子的緩沖液及培養(yǎng)液，其成分會(huì)導(dǎo)致血細(xì)胞凝集，大大降低細(xì)胞得率及純度。5.部分塑料制品...
Hoechst-細(xì)胞調(diào)亡
2025-08-26 細(xì)胞凋亡是指為維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定，由基因控制的細(xì)胞自主的有序的死亡。細(xì)胞凋亡與細(xì)胞壞死不同，細(xì)胞凋亡不是一件被動(dòng)的過程，而是主動(dòng)過程，它涉及一系列基因的激活、表達(dá)以及調(diào)控等的作用；它并不是病理?xiàng)l件下，自體損傷的一種現(xiàn)象，而是為更好地適應(yīng)生存環(huán)境而主動(dòng)爭取的一種死亡過程。細(xì)胞發(fā)生凋亡時(shí)，就像樹葉或花的自然凋落一樣，對(duì)于這種生物學(xué)觀察，借用希臘“Apoptosis”來表示，意思是像樹葉或花的自然凋落，可譯為細(xì)胞凋亡。其實(shí)從嚴(yán)格的詞學(xué)意義上來說，細(xì)胞程序性死亡與細(xì)胞凋亡是有很大區(qū)別的。...
姬姆薩染色液：細(xì)胞與微生物的“精準(zhǔn)顯影劑”
2025-08-26 姬姆薩染色液是一種由天青Ⅱ與伊紅混合制成的復(fù)合染色劑，其核心作用是通過特異性結(jié)合細(xì)胞內(nèi)不同化學(xué)成分，實(shí)現(xiàn)以下功能：細(xì)胞形態(tài)與結(jié)構(gòu)可視化血細(xì)胞分類：清晰區(qū)分紅細(xì)胞（粉紅色）、白細(xì)胞（紫藍(lán)色/淡紫色）及血小板（淡紫色），常用于外周血細(xì)胞分類和骨髓涂片分析。細(xì)胞器與顆粒顯色：對(duì)嗜酸性顆粒（粉紅色）、嗜堿性顆粒（紫藍(lán)色）及中性顆粒（淡紫色）著色鮮明，輔助識(shí)別細(xì)胞類型及功能狀態(tài)。染色體顯帶：在染色體G顯帶技術(shù)中，通過與DNA結(jié)合呈現(xiàn)深淺交替的橫紋樣帶紋，用于染色體核型分析及遺傳病診斷。...

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