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高分文獻(xiàn)解讀|磷酸甘油酸脫氫酶通過穩(wěn)定蛋白激酶Cδ型mRNA促進(jìn)肝細(xì)胞癌進(jìn)展
2025-09-30
基本信息題目:PhosphoglyceratedehydrogenasestabilizesproteinkinaseCdeltatypemRNAtopromotehepatocellularcarcinomaprogression期刊:SignalTransductionandTargetedTherapyIF:52.7PMID:40681503DOI:10.1038/s41392-025-02304-w通訊作者:汪凱、黃愛龍、唐霓通訊作者單位:重慶醫(yī)科大學(xué)文獻(xiàn)背景代謝重編...
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索萊寶印度墨水使用方法
2025-09-24
印度墨水使用方法:1.取瓶?jī)?nèi)干粉39.6克,加入蒸餾水或去離子水1L,攪拌加熱煮沸至充分溶解,分裝三角瓶,121℃高壓滅菌15min;冷卻至50℃,搖勻倒平板。在室溫可保存一天或在冰箱里貯存數(shù)天(避光,4℃)。2.取樣品333克按MPN三管法分別取100克、10克和1克分裝在各三個(gè)2000ml、250ml和100ml的三角瓶中,在三角瓶中已裝有經(jīng)45℃預(yù)熱的9/10(樣品為1/10)的無(wú)菌蒸餾水或緩沖蛋白胨水,搖勻,在36℃培養(yǎng)18h±2h。3.各取10ml上述...
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索萊寶新型植物基因組試劑盒操作步驟
2025-09-24
索萊寶植物基因組試劑盒采用可以特異性結(jié)合DNA的離心吸附柱和獨(dú)特的緩沖液系統(tǒng)提取植物的基因組DNA。離心吸附柱中采用的硅基質(zhì)材料為本公司特別的新型材料,能夠高效、專一吸附DNA,可最大限度去除雜質(zhì)蛋白及細(xì)胞中其他有機(jī)化合物。下面介紹植物基因組試劑盒操作步驟。操作步驟:使用前先在漂洗液中加入無(wú)水乙醇,加入體積請(qǐng)參照瓶體上的標(biāo)簽。所有離心步驟均為使用臺(tái)式離心機(jī)在室溫下離心。1、植物組織預(yù)處理:取新鮮植物組織(不超過100mg)或干重組織(不超過20mg),于液氮中充分研磨至細(xì)粉狀...
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索萊寶紅細(xì)胞裂解液使用方法
2025-09-24
紅細(xì)胞裂解液是一種去除紅細(xì)胞非常簡(jiǎn)便易行的方法,然而各廠家的紅細(xì)胞裂解液使用方法又不盡相同。下面就以索萊寶所產(chǎn)的紅細(xì)胞裂解液為例詳細(xì)說(shuō)明使用方法。紅細(xì)胞裂解液是利用細(xì)胞內(nèi)外存在鹽離子濃度差而導(dǎo)致細(xì)胞膜脹破的原理來(lái)裂解無(wú)核紅細(xì)胞的。紅細(xì)胞裂解液經(jīng)無(wú)菌處理,主要用于經(jīng)酶消化分散的組織細(xì)胞的分離純化,淋巴細(xì)胞的分離純化以及組織細(xì)胞蛋白與核酸提取等實(shí)驗(yàn)中紅細(xì)胞的去除。紅細(xì)胞裂解液使用說(shuō)明:1.1倍體積的新鮮全血,加入3倍體積的紅細(xì)胞裂解液。如1ml新鮮全血加入3ml紅細(xì)胞裂解液,輕輕...
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蛋白酶k的作用及使用方法
2025-09-24
蛋白酶K,是一種切割活性較廣的絲氨酸蛋白酶。蛋白酶K的應(yīng)用比較廣泛。包括制備脈沖電泳的染色體DNA,蛋白質(zhì)印跡以及去除DNA和RNA制備中的核酸酶。蛋白酶K的一般工作濃度是50—100μg/ml。在較廣的pH范圍內(nèi)(pH4-12.5)均有活性。蛋白酶K的主要作用:蛋白酶K在原位雜交技術(shù)中通常用于雜交前的處理,它具有消化包圍靶DNA蛋白質(zhì)的作用,以增加探針與靶核酸結(jié)合的機(jī)會(huì),提高雜交信號(hào).但蛋白酶K的濃度過高、消化時(shí)間過長(zhǎng)或孵育溫度過高時(shí),都會(huì)對(duì)細(xì)胞的結(jié)構(gòu)有一定的破壞,導(dǎo)...
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動(dòng)物基因組DNA提取方法及步驟介紹
2025-09-24
基因組DNA提取是最常見分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)之一。今天給大家介紹的是動(dòng)物基因組DNA提取。DNA是遺傳信息的載體,是最重要的生物信息分子,是分子生物學(xué)研究的主要對(duì)象,為了進(jìn)行測(cè)序、雜交、基因表達(dá)、文庫(kù)構(gòu)建等實(shí)驗(yàn),獲得高分子量和高純度的基因組DNA是非常重要的前提,因此基因組DNA的提取也是分子生物學(xué)試驗(yàn)技術(shù)中最重要、最基本的操作之一。動(dòng)物基因組DNA提取實(shí)驗(yàn)步驟:1、取新鮮或冰凍動(dòng)物組織塊0.1g(0.5cm3),盡量剪碎。置于玻璃勻漿器中,加入1ml的細(xì)胞裂解緩沖液勻漿至不見組織...
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胸腺嘧啶核苷的原理及配置方法
2025-09-22
應(yīng)用:胸腺嘧啶核苷為生化試劑,制備生物培養(yǎng)基,例如HAT選擇性培養(yǎng)基的制備。原理:在單抗制備中,由于需要進(jìn)行選擇性殺死非目標(biāo)細(xì)胞,所以使用添加HAT的選擇性培養(yǎng)基,其依據(jù)是細(xì)胞中的DNA合成有兩條途徑:一條途徑是生物合成途徑(“D途徑”),即由氨基酸及其他小分子化合物合成核苷酸,為DNA分子的合成提供原料。在此合成過程中,葉酸作為重要的輔酶參與這一過程,而HAT培養(yǎng)液中氨基蝶呤是一種葉酸的拮抗物,可以阻斷DNA合成的“D途徑”。另一條途徑是應(yīng)急途徑或補(bǔ)救途徑(“S途徑”),它...
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簡(jiǎn)述TBST緩沖液的配制及應(yīng)用
2025-09-22
TBST中含有Tris-Hcl,NaCl,Tween20這三種物質(zhì),是做WESTERNBLOT中常用的一種緩沖液。TBST緩沖液的配制1000ml×TBST的配置先稱量NaCl40g,倒入燒杯中,加DDW蒸餾水400ml,再稱量NaCl47.6g,倒入剛才的那個(gè)燒杯中(PS:由于NaCl的量太多,一次稱量不方便,所以分兩次稱量,且易于溶解)。往燒杯中加入Tris—HCl緩沖液100ml,最后加(吐溫20)5ml,轉(zhuǎn)入1000ml容量瓶中,在定容,轉(zhuǎn)移即可。TBST緩沖液的應(yīng)用...